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Twist Bioscience公司推出的FlexPrep? 超高通量文庫(kù)制備試劑盒，通過(guò)引入新穎的 Normalization by Ligation ? (NBL) 技術(shù)，改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)酶促片段化文庫(kù)制備方法，以低成本實(shí)現(xiàn)高通量，旨在加速芯片用戶(hù)在群體基因組學(xué)和農(nóng)業(yè)基因組學(xué)領(lǐng)域的NGS研究。
Twist FlexPrep? 超高通量(UHT)文庫(kù)制備試劑盒
Twist FlexPrep ? 超高通量（UHT）文庫(kù)制備試劑盒的工作流程旨在為簡(jiǎn)化和大規(guī)模擴(kuò)展 Twist 已建立的酶切方法而設(shè)計(jì)。Normalization by Ligation ? (NBL) 技術(shù)消除了在文庫(kù)制備前對(duì)每個(gè)DNA樣本進(jìn)行定量和對(duì)大量人工耗費(fèi)的需要，從而大大節(jié)省了每個(gè)樣本的成本。在多孔板中對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行片段化和接頭連接后，*多可以將12個(gè)樣本合并到一個(gè)管中，顯著減少后續(xù)磁珠純化和擴(kuò)增步驟所需的試劑用量和成本?？衫么嗽噭┖兄苽涞奈膸?kù)，使用靶向富集組合進(jìn)行全基因組或靶向測(cè)序。所有多孔板和管式都經(jīng)過(guò)優(yōu)化，以確保與關(guān)鍵自動(dòng)化系統(tǒng)兼容，這對(duì)于希望簡(jiǎn)化工作流程并減少動(dòng)手時(shí)間的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)是一個(gè)關(guān)鍵考慮因素。
關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
集成的NBL技術(shù)
? 消除前期歸一化處理
? 無(wú)需中間定量
? 樣品起始量區(qū)間寬泛（30ng-300ng）
早期混樣節(jié)省成本
? 接頭連接反應(yīng)之后將96個(gè)樣本合并到8管中
? 降低上游反應(yīng)體積
? 減少下游反應(yīng)耗材
專(zhuān)為超高容量多重測(cè)序而生
? 單個(gè)試劑盒多達(dá)1152個(gè)UDIs
? 反應(yīng)數(shù)量擴(kuò)大12倍
? 每個(gè)靶向富集反應(yīng)可支持96個(gè)樣本
數(shù)據(jù)展示
消除前期歸一化和中間定量樣品
Twist FlexPrep UHT文庫(kù)制備試劑盒采用新穎的 Normalization by Ligation（NBL）技術(shù)，消除了前期和中間樣品定量的需要，簡(jiǎn)化了測(cè)序工作流程（圖1）。
專(zhuān)為節(jié)省成本且不影響質(zhì)量而構(gòu)建的工作流程
FlexPrep標(biāo)準(zhǔn)化接頭包含12個(gè)內(nèi)聯(lián)條形碼，它允許超高通量和自動(dòng)化友好的多重測(cè)序策略（圖2）。
Twist FlexPrep UHT文庫(kù)制備試劑盒，通過(guò)在一個(gè)試劑盒的單次測(cè)序中運(yùn)行多達(dá)1152個(gè)樣本來(lái)實(shí)現(xiàn)測(cè)序通量*大化，這種提高效率的策略可以轉(zhuǎn)化為節(jié)省試劑、耗材和時(shí)間成本。與單獨(dú)處理樣本相比，F(xiàn)lexPrep?將使用的耗材減少了12倍，并將移液器吸頭的數(shù)量從標(biāo)準(zhǔn)試劑盒中使用的17,000多個(gè)減少到FlexPrep? UHT試劑盒中使用的不到4,000個(gè)。
Twist FlexPrep UHT產(chǎn)量均一，且插入片段尺寸穩(wěn)定
Twist FlexPrep UHT Library Preparation Kit支持30 ng至300 ng的起始量范圍，對(duì)全基因組測(cè)序（WGS）或靶向富集（TE）的均勻性和插入片段尺寸的影響*小（如圖3和圖4）。
通過(guò)靶向富集確定感興趣區(qū)域
FlexPrep的工作流程也可以擴(kuò)展到靶向富集，其中單個(gè)富集反應(yīng)可用于多達(dá)96個(gè)樣品。
與其他Twist文庫(kù)制備試劑盒一樣，F(xiàn)lexPrep UHT生成的高復(fù)雜性文庫(kù)在靶向富集后具有均勻的覆蓋率（表1）。結(jié)合Twsit定制Panel，以實(shí)現(xiàn)對(duì)感興趣的基因組區(qū)域的可調(diào)控且均勻的覆蓋。
